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Trasplante de Hepatocitos Aislados

En el hígado adulto normal existen aproximadamente doscientos cincuenta mil millones de hepatocitos, que representan el sesenta por ciento de las células hepáticas y el ochenta por ciento del volumen del órgano. Se calcula que los hepatocitos realizan más de mil quinientas funciones diferentes, entre las que cabe destacar el metabolismo intermediario de los aminoácidos y los hidratos de carbono (mantenimiento de la glucemia), la síntesis y degradación de las proteínas (factores de la coagulación y proteínas de transporte, entre otros), el metabolismo, degradación y eliminación de diversas sustancias y la regulación del metabolismo de los lípidos y el colesterol. Esta diversidad de funciones explica por qué los sistemas de soporte hepático que no utilizan tejido hepático vivo, tales como hemodiálisis, plasmaféresis, exanguinotrasfusión o hemoperfusión a través de columnas absorbentes, tratamientos que eliminan transitoriamente las sustancias tóxicas que el hígado insuficiente no puede eliminar, pero que no suplen la función hepática de síntesis, no han sido útiles en situaciones de insuficiencia hepática aguda o crónica.
De los sistemas de soporte hepático que sí utilizan tejido hepático vivo, únicamente el trasplante hepático ha mejorado la supervivencia de los pacientes con insuficiencia hepática. Sin embargo, por razones de tipo médico o por escasez de órganos donantes, no se puede realizar en todos los candidatos potenciales. Cuando además de sustituir la función del hígado insuficiente se precisa corregir un defecto anatómico (p.e. en la atresia de vías biliares o en la colangitis esclerosante), el trasplante hepático ortotópico es el tratamiento de elección. Sin embargo, existen otras situaciones en las que el aporte de células hepáticas aisladas podría ser suficiente. Tal es el caso de la insuficiencia hepática aguda grave o de las enzimopatías de origen hepático. Como posible alternativa al trasplante hepático ortotópico, en estas circunstancias, surge el trasplante de hepatocitos aislados, tratamiento potencialmente útil para
cubrir los mismos objetivos, y técnicamente más sencillo. En este capítulo se resume el estado actual del trasplante de hepatocitos.

Aislamiento y Preparación de los Hepatocitos
Los hepatocitos se aíslan mediante la técnica de digestión enzimática con colagenasa, perfundida a través de la vena porta. En la rata se utiliza colagenasa a una concentración del 0.05% 1,2, y se obtienen 1-5 x108 células /rata (entre el 50% y el 75% del total de hepatocitos existentes), con una viabilidad celular del 85 al 95% y con una contaminación de células no parenquimatosas inferior al 3%. Los hepatocitos así aislados se pueden purificar más, utilizando Ficoll o Percoll. En el animal grande, el rendimiento de esta técnica es inferior que en la rata 3, siendo preciso aumentar la concentración de colagenasa (hasta el 0.15%) o el tiempo de perfusión con la misma .

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